Оглавление

Предисловие

Введение

1. Общие правила использования лаборатории
2. Биозащита
3. Некоторые полезные советы по расчетам, измерениям массы и приготовлению растворов

Иммунология

1. Приготовление антигена
2. Техника вакцинации
3. Получение антител от мыши
4. Забор крови и приготовление сыворотки
5. Гемагглютинация
6. Иммуно-электрофорез, иммунодиффузия
7. Двойная иммунодиффузия
8. Простая радиальная иммунодиффузия
9. Метод иммунопреципитации
10. Однонаправленная простая электроиммунодиффузия
11. Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA)
12. Методика проведения иммуноферментного анализа
13. Вестерн-блоттинг
14. Очистка иммуноглобулина
15. Соединение фермента с антителом
16. Приготовление лимфоцитов
17. Анализ бляшкообразующих клеток

Микробиология.

Базовые требования безопасности в лаборатории

1. Приготовление жидкой питательной среды
2. Приготовление твердой питательной среды
3. Выделение чистой культуры бактерий
4. Измерение микробного роста
5. Выделение стафилококков
6. Метод Грамма
7. Определение количества бактерий в молоке

Культуры животных клеток

1. Общие представления о культурах клеток и тканей
2. Приготовление сред
3. Приготовление сыворотки
4. Первичная клеточная культура
5. Культивирование и субкультивирование животных клеток
6. Прижизненное окрашивание и прижизненный подсчет
7. Кариотипирование хромосом

Биохимические методы

1. Водородный показатель pH, буферы
2. Биологические буферы
3. Центрифугирование
4. Колориметрия
5. Спектрофотометр
6. Определение концентрации белков
7. Определение концентрации аминокислот
8. Определение концентрации карбогидратов
9. Определение общей концентрации сахаров
10. Определение концентрации нуклеиновых кислот
11. Определение концентрации РНК
12. Выделение липидов
13. Анализ активности амилазы

Аналитические методы разделения

1. Электрофорез
2. Электрофорез в агарозном геле
3. Электрофорез молекул ДНК в геле
4. Электрофорез молекул РНК в геле
5. Электрофорез в полиакриламидном геле
6. Вестерн-блоттинг
7. Хроматография
8. Хроматография аминокислот
9. Разделение аминокислот хроматографией на бумаге
10. Хроматографическое разделение сахаров

Гематология

1. Определение общего количества лейкоцитов
2. Определение общего количества эритроцитов
3. Определение уровня гемоглобина
4. Определение показателя гематокрита
5. Определение среднего содержания гемоглобина в эритроцитах
6. Определение скорости оседания эритроцитов по методу Вестергрена
7. Приготовление и окраска мазка крови
8. Исследование лейкоцитов и их распределения по типам

Физиология

1. Влияние температуры на скорость сердцебиения
2. Изучение эструса по вагинальному мазку у крыс
3. Определение частоты дыхания у рыб

Приложения

Приложения

Алфавитный указатель

Предисловие

Предисловие редактора перевода

Учебное пособие известного специалиста в области экспериментальной биологии А. Дутты представляет собой собрание практических указаний по организации учебной биологической лаборатории. В ней можно найти конкретные рекомендации по созданию лабораторных работ в биологическом практикуме.

В русскоязычной литературе наблюдается явная нехватка описаний лабораторных работ по биологии, особенно таких, в которых бы активно применялись физические методы исследования и химический анализ. Данная книга предназначена для того, чтобы, хотя бы отчасти, восполнить этот дефицит.

В ней содержатся описания приборов и методик химического анализа с учётом специфики лабораторной практики экспериментальной биологии. В учебном пособии  представлены основные «вечные темы» экспериментальной биологии: иммунология, микробиология, гематология и физиология. Также в нем можно найти практические указания по применению биохимических методов: центрифугирования, колориметрии и спектрофотометрии. Кроме того, рассмотрены методы анализа и разделения веществ: электрофорез, хроматография, вестерн-блоттинг.

Учебное пособие предназначено для студентов, преподавателей и специалистов любых биологических специальностей. Оно, без сомнения, сослужит добрую службу исследователям и преподавателям, работающим в биологической лаборатории и занимающимся постановкой лабораторных работ по биологии, биохимии и биофизике.

Рекомендуемая литература по затронутым темам

1. Практикум по иммунологии / Под ред. И.А. Кондратьевой, А.А. Ярилина. — М.: Академия, 2004.

2. Практикум по микробиологии / Под ред. А.И. Нетрусова. — М.: Академия, 2005.

3. Практикум лабораторных работ с иллюстрированными заданиями по микробиологии, иммунологии и вирусологии / Под ред. В.Н. Царева, А.А. Воробьева. — М.: МИА, 2008.

4. Нормальная физиология — практикум / Под ред. К.В. Судакова. — М.: МИА, 2008.